Por fin tengo tiempo para publicar esto.
Desgraciadamente, el fin de semana pasado tuve que ir a la universidad a trabajar por un par de horas. Aunque uno es el que diseña los experimentos, al trabajar con células no existe un control absoluto sobre lo que va a ocurrir. En ocasiones estas crecen sin problemas y en otras remolonean bastante... Digamos que tienen su propio carácter, a pesar de ser entidades sin "mente". En definitiva, el que cree estar en control termina controlado. No es plan de perder todo el tiempo, dinero y trabajo invertido.
Salgo a la calle... Hay sol! Por fin, esto comienza a parecerse a una primavera... A día de hoy, casi una semana más tarde, volvieron las nubes. En fin, toca bajar por Lydgate lane.
Crookes road...
Whitham road...
Un poco más adelante llegamos a la facultad. El día está demasiado bueno para usarlo dentro de un laboratorio, pero otra no queda.
Esta es la vista desde las escaleras de la facultad.
Mi oficina. Claramente desierta porque, qué persona, medianamente cuerda, quiere trabajar un fin de semana? Respuesta: los estudiantes de doctorado no están medianamente cuerdos.
Mi mesa. No está tan mal. Algo desordenada, pero una maravilla comparada con las de otra gente.
Llegamos al laboratorio. Este fue mi puesto de trabajo ese día. Ya preparé el bote con desinfectante, el medio de cultivo, la solución salina de tamponado o como se diga en español. Es más fácil en inglés. A la derecha están la micropipeta y la "pistola" para pipetas de plástico.
Bueno, aquí están las dichosas. Son celulas madre adultas de médula ósea de rata. No os pongáis muy cómodas que hoy es día de mudanza y en nada os tengo que sacar de ahí.
Después de ver que no haya infecciones indeseadas de hongos o levaduras, lo que se hace es sacar el medio de cultivo viejo, lavar las células con la solución salina y añadir 5 ml de una mezcla de tripsina/eosina para que la células se separen del fondo del tarro. Después de 5 minutos se añaden 0.5 ml de suero fetal bovino para detener el efecto de la tripsina/eosina y se recoge todo en un tubo de 20 ml, como muestro en la siguiente foto.
Ahora toca darse unas vueltas en la centrifugadora, para separar las celulas del resto de líquido. Son 5 minutos a 1000 revoluciones por minuto. Da tiempo suficiente para ir al baño.
Una vez terminado el paseo nuestras amigas están en el fondo del tubo. Se elimina el líquido que sobra, se añade medio de cultivo recién preparado y se mezcla bien para que las células vuelvan a "flotar" y no estén mas concentradas en una parte del tubo que en otras. Después toca contar todas las células pero, por supuesto, no se hace contando una a una. Esto se hace en un hemocitometro, que es la plaquita de vidrio que muestro en la siguiente foto... A mi me salieron unas 4.600.000 células en total.
El método consiste en contar cuantas células hay en una cuadrícula como la que se ve aquí abajo y luego hacer unas cuentas, resultando en una aproximación de cuantas células hay por mililitro de mezcla.
Y ya está. Sabiendo esto puedo calcular cuantos ml tengo que poner en placas nuevas para cultivar la cantidad de celulas requeridas y asi sigan creciendo y obtener más celulas para el experimento final.
Contentas y felices, como las lombrices, se guardan en el incubador a 37 grados y ahí se quedan hasta que vuelven a ocupar todo el lugar disponible en el tarro.
Desgraciadamente, de nuevo han sido más rápidas de lo que pensaba y me toca volver al laboratorio mañana. Otro fin de semana trabajando, y esta vez por más horas... Acuérdense de mí cuando esten disfrutando del tiempo libre.
